Disputado partido único el día 7 de octubre de 2009, aquí están los resultados de la segunda ronda de la Copa del Rey de futbol de la temporada 2009 – 2010.
| Local | Visitante | |
|---|---|---|
| Ontinyent CF | 0-0 (3-5) | Cultural Leonesa |
| UD Puertollano | 2 – 1 | UE Sant Andreu |
| CD Lagun Onak | 1 – 2 | AD Alcorcón |
| UD Marbella | 2 – 1 | Alicante CF |
| Mérida UD | 1 – 3 | CD Alcoyano |
| CF Atlético Ciudad | 0 – 0 (5 – 4) | Polideportivo Ejido |
| UD Salamanca | 2 – 0 | FC Cartagena |
| Córdoba CF | 0 – 1 | Rayo Vallecano |
| Recreativo de Huelva | 2 – 1 | UD Las Palmas |
| UD Puertollano | 3 – 0 | Zamora CF |
| Girona FC | 1 – 3 | Celta de Vigo |
| Hércules CF | 2 – 0 | SD Huesca |